Penampan ini Digunakan untuk Meneliti Pergerakan DNA
Penampan ini mempunyai kekuatan ionik yang rendah dan kapasiti penimbangan yang rendah. Ia paling sesuai untuk elektroforesis besar (> 20 kb) DNA dan perlu diganti dengan kerap atau dikitar semula untuk jangka masa gel (> 4 jam) lebih lama.
Dengan itu, anda mungkin ingin mempertimbangkan beberapa kumpulan penimbal.
Memandangkan penimbal mudah dibuat dan langkah-langkah boleh dilakukan dengan cepat, membuat lebih daripada satu kumpulan pada satu masa tidak perlu terutamanya memakan masa atau sukar untuk ditarik. Menggunakan arahan di bawah, ia hanya perlu mengambil masa 30 minit untuk membuat penyangga TAE. Ini caranya:
Sediakan Penyelesaian Stok EDTA
Larutan asid EDTA (etilenediamine tetraacetic) disediakan lebih awal daripada masa. EDTA tidak akan pergi sepenuhnya ke dalam penyelesaian sehingga pH diselaraskan kepada kira-kira 8.0. Untuk penyelesaian stok 500 mililiter 0.5 M EDTA, timbangkan 93.05 gram garam EDTA disodium (FW = 372.2). Larutkan dalam 400 mililiter air deionized dan laraskan pH dengan natrium hidroksida (NaOH). Laraskan penyelesaian kepada jumlah akhir 500 mililiter.
Whip Up Solusi Saham TAE
Buat penyelesaian stok (50x) TAE dengan menimbang 242 gram asas Tris (FW = 121.14) dan larut dalam kira-kira 750 mililiter air berkhasiat.
Berhati-hati menambah 57.1 mililiter asid glasial dan 100 mililiter 0.5 M EDTA (pH 8.0). Selepas itu, laraskan penyelesaian kepada jumlah akhir 1 liter. Penyelesaian stok ini boleh disimpan pada suhu bilik. PH penampan ini tidak diselaraskan dan perlu kira-kira 8.5.
Sediakan Penyelesaian Kerja TAE
Penyelesaian kerja buffer 1x TAE dibuat dengan hanya mencairkan larutan stok sebanyak 50x dalam air berair.
Kepekatan larutan akhir ialah 40 mM. Tris-asetat dan 1 mM EDTA. Penampan kini sedia untuk digunakan dalam menjalankan gel agarose.
Apa yang Anda Perlu Penampan
Oleh kerana membuat penyangga TAE hanya memerlukan set arahan yang cepat dan ringkas, bilangan bahan yang diperlukan untuknya tidak berlebihan. Anda hanya perlu garam disodium EDTA, asas Tris, dan asid asetik glasial.
Membuat penampan juga memerlukan standard pH meter dan penentukuran, sesuai. Anda juga perlu 600 milliliter dan 1500 milliliters beakers atau flasks serta silinder lulus. Akhirnya, anda perlu air berair, bar kacau, dan pinggan stir.
Mengakhiri
Di mana anda bercadang untuk membuat penampan - di tapak sekolah, tapak kerja, atau lokasi lain, seperti rumah anda? Periksa inventori sebelum anda mula memastikan anda mempunyai semua bahan di atas untuk penampan TAE.
Sekiranya anda lebih suka tidak perlu membayar bahan-bahan, memilih untuk membuat penampan di luar rumah anda disyorkan. Anda boleh memesan bahan-bahan yang anda perlukan secara dalam talian atau lawati kedai khusus untuk mereka.