Penampan ini boleh digunakan untuk aplikasi biologi pada pH berhampiran neutral
Nilai tiga pKa untuk asid fosforik (dari Buku Panduan Kimia dan Fizik CRC) ialah 2.16, 7.21 dan 12.32. Monosodium fosfat dan asas konjugatnya, disodium fosfat biasanya digunakan untuk menghasilkan buffer nilai pH sekitar 7, untuk aplikasi biologi, seperti yang ditunjukkan di sini.
Membuat penyangga ini sedikit lebih sukar daripada membuat buffer TAE dan TBE. Walau bagaimanapun, ia tidak begitu sukar. Hanya rata-rata. Ia perlu mengambil masa kira-kira 10 minit untuk menyiapkan penimbal ini. Ini caranya.
1. Memutuskan pada Buffer Properties
Sebelum membuat penampan, anda harus terlebih dahulu mengetahui apa molariti yang anda inginkan, jumlah kuantiti yang hendak dibuat dan apakah pH yang dikehendaki. Kebanyakan buffer berfungsi dengan baik pada kepekatan antara 0.1 M dan 10 M. PH harus berada dalam 1 pH unit asid / konjugat asas pKa. Untuk kesederhanaan, pengiraan sampel ini adalah untuk 1 liter buffer.
2. Tentukan Nisbah Asid ke Asas
Gunakan persamaan Henderson-Hasselbalch (di bawah) untuk menentukan nisbah asid ke asas yang diperlukan untuk membuat penampan pH yang dikehendaki. Gunakan nilai pKa yang terdekat dengan pH yang anda inginkan dan nisbahnya akan merujuk kepada pasangan konjugat berasaskan asid yang sepadan dengan pKa itu.
Persamaan HH: pH = pKa + log ([Asas] / [Asid])
Untuk penampan pH 6.9, [Asas] / [Asid] = 0.4898
Gantikan [Acid] dan Selesaikan [Base]
Molariti yang diinginkan penimbal adalah jumlah [Asid] + [Asas].
Untuk penampan 1 M, [Asas] + [Asid] = 1 dan [Asas] = 1 - [Asid]
Dengan menggantikan ini ke persamaan nisbah, dari langkah 2, anda dapat:
[Asid] = 0.6712 mol / L
Selesaikan untuk [Acid]
Menggunakan persamaan: [Asas] = 1 - [Asam], anda boleh mengira bahawa:
[Asas] = 0.3288 mol / L
3. Campurkan Asid dan Konjugasi Base
Selepas anda menggunakan persamaan Henderson-Hasselbalch untuk mengira nisbah asid ke asas diperlukan untuk penampan anda, sediakan hanya di bawah 1 liter larutan dengan menggunakan jumlah monosodium fosfat dan disodium fosfat yang betul.
4. Semak pH
Gunakan pukulan pH untuk mengesahkan bahawa pH yang betul untuk penampan dicapai. Laraskan sedikit seperti yang diperlukan, menggunakan asid fosforik atau natrium hidroksida (NaOH).
5. Betulkan Jilid
Apabila pH yang dikehendaki dicapai, bawa jumlah buffer kepada 1 liter. Kemudian cair penampan seperti yang dikehendaki. Penampan yang sama boleh dicairkan untuk menghasilkan buffer 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M atau apa-apa di antara.
6. Tips untuk Buffer
Ingatlah bahawa pKa tidak mudah diukur dengan nilai yang tepat. Nilai yang sedikit berbeza mungkin terdapat dalam kesusasteraan dari pelbagai sumber.
7. Apa yang Anda Perlu
Untuk membuat penampan, anda memerlukan tiga bahan, sementara baki bahan adalah peralatan. Bahan-bahan tersebut adalah monosodium fosfat, disodium fosfat, dan asid fosforik atau natrium hidroksida untuk menyesuaikan pH.
Anda juga memerlukan pH meter dan probe dan peralatan yang sesuai. Ini termasuk kelalang volumetrik, silinder tamat, tabung dan bar kacau.
Akhir sekali, anda perlu memasang hotplate.